在我國，核酸檢測試劑是按照(zhào)三類醫療器械進行管理(lǐ)的(de)。正常情況下(xià)試劑開發完成後，需經過臨床試驗确認結果的(de)有效性後，再由國家藥品監督管理(lǐ)局審批才能正式上市。但目前由于新型冠狀病毒疫情的(de)緊迫性，1月(yuè)26日晚間，國家藥品監督管理(lǐ)局啓動應急審批程序，僅4天就批準了(le)4種新型冠狀病毒檢測試劑上市，緊急應對(duì)當前疫情。目前國内先後已有至少7種新型冠狀病毒核酸檢測試劑被批準上市。國家藥品監督管理(lǐ)局的(de)努力有效地緩解了(le)疫情防控中試劑不足導緻疑似病例無法盡早确診的(de)問題，但大(dà)量試劑的(de)緊急上市不可(kě)避免地因産品質量問題和(hé)過度宣傳等原因引發了(le)一些負面評價，甚至出現了(le)據稱能十幾分(fēn)鐘(zhōng)檢測出結果、敏感度和(hé)特異度達到100%的(de)過度宣傳。因此，如何保證核酸檢測試劑質量的(de)同時(shí)，規範核酸檢測試劑的(de)市場(chǎng)宣傳，引導大(dà)衆對(duì)檢測試劑的(de)正确認知，是當前疫情防控中的(de)一個(gè)重要問題。此外，現階段的(de)新型冠狀病毒核酸檢測試劑均爲應急性審批（注冊證有效期爲一年），最終還(hái)需要按照(zhào)法規要求補充完成所有的(de)臨床驗證才能延續注冊，從而用(yòng)于常規臨床診斷。

目前大(dà)多(duō)數新型冠狀病毒檢測試劑都是靶向新型冠狀病毒的(de)特定區(qū)域，通(tōng)過RT-PCR擴增病毒的(de)ORF1ab基因和(hé)N基因等進行熒光(guāng)定量檢測。然而，新型冠狀病毒屬于RNA病毒，很不穩定，容易産生變異。現在針對(duì)該病毒的(de)研究剛剛開始，病毒基因的(de)變異頻(pín)率如何、是否存在突變熱(rè)點或進化(huà)上的(de)保守區(qū)域都尚未可(kě)知。而在目前的(de)情況下(xià)，試劑開發企業很難得(de)到大(dà)規模臨床樣本進行試劑盒開發和(hé)臨床驗證。這(zhè)就導緻在試劑開發設計中隻能根據有限的(de)公開數據進行引物(wù)設計，但對(duì)大(dà)樣本中的(de)實際情況缺乏了(le)解，隻能在臨床一線用(yòng)了(le)再說。因此，在現階段的(de)特殊時(shí)期，這(zhè)些試劑在臨床應用(yòng)之前無法保證必要的(de)方法學驗證，也(yě)很難排除大(dà)規模人(rén)群中存在個(gè)别樣本由于擴增區(qū)突變導緻假陰性的(de)可(kě)能。如果能對(duì)已有的(de)确診病例數據進行一定程度的(de)分(fēn)析，确定可(kě)靠的(de)核酸檢測區(qū)域，而不是像現在這(zhè)樣由各個(gè)企業各自爲戰，那麽檢測結果的(de)可(kě)靠性和(hé)一緻性肯定會得(de)到提升。

國家衛健委發布的(de)《新型冠狀病毒感染的(de)肺炎診療方案（試行第五版）》中指出，在鼻咽拭子、痰、下(xià)呼吸道分(fēn)泌物(wù)、血液、糞便等标本中可(kě)檢測出新型冠狀病毒核酸。因爲病毒性肺炎患者在下(xià)呼吸道具有更高(gāo)的(de)病毒載量，所以下(xià)呼吸道分(fēn)泌物(wù)的(de)檢出率會更高(gāo)一些，但獲取肺泡灌洗液等下(xià)呼吸道樣本操作上要求較高(gāo)，且易噴濺，傳播風險高(gāo)，比較耗時(shí)。患者從肺部深咳咳出的(de)痰也(yě)屬于下(xià)呼吸道樣本，但對(duì)于已經出現症狀的(de)患者，特别是體質較弱的(de)老年患者，往往隻能從上呼吸道幹咳咳出部分(fēn)白痰，其檢測價值就大(dà)大(dà)降低了(le)。而且此時(shí)雖然機體啓動了(le)咳嗽反射，但很難将肺部深處的(de)病毒或壞死物(wù)質排出體外，相反一部分(fēn)病毒會随著(zhe)幹咳的(de)飛(fēi)沫排出體外，反而加重了(le)病毒的(de)傳播。

在各種核酸檢測樣本采樣中，鼻、咽拭子是最常用(yòng)的(de)采樣方式，但是這(zhè)類樣本的(de)病毒核酸檢出率與病毒感染進程密切相關。以甲流爲例，一般在發病24～72 h内病毒在鼻、咽部的(de)濃度達到高(gāo)峰，然後迅速下(xià)降；一周左右快(kuài)速抗原檢測往往即呈陰性。而目前對(duì)新型冠狀病毒的(de)病程轉歸并不完全清楚，采樣的(de)最佳時(shí)機仍不确認。尤其是該病潛伏期長(cháng)，絕大(dà)多(duō)數患者就診時(shí)可(kě)能已經遷延了(le)數天至數周，是否是鼻、咽拭子檢測的(de)最佳時(shí)期，樣本内病毒載量是否仍然在方法學的(de)檢測範圍内還(hái)有待确定。除了(le)采樣時(shí)機外，鼻、咽拭子采樣操作也(yě)是影(yǐng)響檢測結果的(de)一個(gè)重要因素。标準的(de)鼻咽拭子采樣中，醫務人(rén)員(yuán)都要面對(duì)患者，将鼻拭子或咽拭子探入患者鼻腔或咽峽部接觸式采樣。部分(fēn)患者受到拭子刺激後難免會出現咳嗽、噴嚏等應激反應，此時(shí)患者呼吸道内噴出的(de)大(dà)量可(kě)能含有病毒飛(fēi)沫的(de)氣體會直接噴射到采樣醫務人(rén)員(yuán)的(de)面部，對(duì)一線醫務人(rén)員(yuán)造成極大(dà)的(de)危害。在巨大(dà)的(de)感染壓力下(xià)，也(yě)有可(kě)能會出現個(gè)别樣本因爲采樣不徹底、不完全而導緻的(de)假陰性檢測結果。此外，采樣的(de)手勢與采樣的(de)拭子材質對(duì)樣本質量都至關重要。無論如何，在目前疫情非常嚴重的(de)情況下(xià)，醫務人(rén)員(yuán)是在冒著(zhe)極大(dà)的(de)風險進行工作，爲一線醫務人(rén)員(yuán)配備醫用(yòng)N95口罩、護目鏡、手套、防護面罩以及防護服以确保其自身安全對(duì)于疫情的(de)防控是非常重要的(de)。

除了(le)上述因素外，采樣後樣本的(de)保存和(hé)運輸同樣會影(yǐng)響檢測結果。各種RNA病毒的(de)核酸由于自降解和(hé)生物(wù)酶介導的(de)降解，是最難以穩定保存的(de)生物(wù)分(fēn)子之一。樣本如何保存通(tōng)常是決定RNA病毒樣本質量的(de)關鍵因素。因此，含有RNA病毒的(de)樣本建議(yì)存放于專用(yòng)的(de)病毒保存液中，且必須在冷(lěng)藏狀态下(xià)（即4 ℃或更低溫度）保存并盡快(kuài)運輸送檢。新型冠狀病毒作爲一種新發現的(de)RNA病毒，其儲存、運輸的(de)要求可(kě)能更高(gāo)，隻有專業的(de)醫用(yòng)物(wù)流機構才能保證樣本運輸的(de)可(kě)靠性。然而目前絕大(dà)多(duō)數醫院在樣本采集後需要送至疾控中心統一檢測，從采樣到實際開展檢測可(kě)能經過長(cháng)時(shí)間的(de)等待，采樣醫院以及開展檢測的(de)實驗室是否具備專業的(de)樣本保存和(hé)低溫運輸能力，均是保證新型冠狀病毒準确檢測的(de)重要因素。

目前的(de)檢測試劑大(dà)多(duō)僅針對(duì)核酸提取後的(de)檢測，而對(duì)于RNA提取的(de)方法以及質量未做(zuò)明(míng)确說明(míng)；加入到體系内擴增的(de)樣本量也(yě)通(tōng)常以體積而非RNA量來(lái)約定，這(zhè)可(kě)能導緻不同方法學提取的(de)RNA質量良莠不齊、從而影(yǐng)響到最終的(de)擴增效果。因此增加樣本内标的(de)擴增引物(wù)用(yòng)于控制RNA提取效率，可(kě)以有效控制因核酸提取質量欠佳導緻的(de)假陰性。

此外，按照(zhào)目前試劑盒的(de)說明(míng)書(shū)，針對(duì)一個(gè)患者大(dà)多(duō)都隻是檢測一個(gè)部位的(de)樣本、并隻做(zuò)一個(gè)反應，因此缺乏樣本間、樣本内的(de)重複也(yě)可(kě)能是造成假陰性的(de)原因。因此，增加同一患者不同部位的(de)采樣（例如同時(shí)采取鼻拭子和(hé)咽拭子樣本）、利用(yòng)不同試劑盒進行平行檢測，可(kě)以有效控制因缺乏重複導緻的(de)假陰性。

新型冠狀病毒肺炎已成爲當前公衆、社會、政府密切關注的(de)事件。在應對(duì)引起本次肺炎疫情的(de)新型冠狀病毒上，廣大(dà)的(de)檢驗專家們也(yě)全力以赴，制定了(le)詳盡的(de)生物(wù)安全和(hé)防護措施，爲疾病診斷提供了(le)各類檢測手段與技術，尤其是核酸檢測發揮了(le)應有的(de)技術優勢，爲病毒的(de)早期診斷、疫情監測提供了(le)可(kě)行的(de)解決方案，也(yě)是确診病毒感染最重要的(de)依據。将核酸檢測做(zuò)到準确與快(kuài)速，對(duì)大(dà)量疑似病例進行确診是當下(xià)重要任務。

選擇敏感度更高(gāo)的(de)核酸檢測方法（例如數字PCR等技術），可(kě)以減少因RT-PCR自身敏感度不足導緻的(de)假陰性。但在目前絕大(dà)多(duō)數試劑均基于RT-PCR方法的(de)現況下(xià)，保證試劑盒質量、規範采樣/保存/運輸流程、完善醫院的(de)實驗室設備、提高(gāo)檢測人(rén)員(yuán)的(de)技術水(shuǐ)平以及優化(huà)檢測流程（例如增加樣本内标控制RNA提取效率、增加樣本間樣本内重複）等，都是提高(gāo)新型冠狀病毒核酸檢測結果準确性的(de)有效手段，也(yě)是目前疫情防控的(de)關鍵。随著(zhe)檢測試劑上市的(de)日益增多(duō)，有必要盡早信息資源共享，并進行多(duō)中心的(de)性能評價，以明(míng)确某些靈敏度高(gāo)、特異性好的(de)試劑供醫療機構進行使用(yòng)，這(zhè)也(yě)是保障目前疫情防控的(de)當務之急。